Oui en effet, si le chloroforme n'est pas correctement éliminé de la préparation de phage. Le chloroforme est normalement ajouté à l'étape d'isolement/purification du phage pour se débarrasser des bactéries. … Le chloroforme n'est pas une étape essentielle et il faut tenir compte du fait qu'il peut inactiver d'autres phages présents dans les bactéries.
Qu'est-ce que le chloroforme fait à E coli ?
Chloroforme dans ce contexte tue rapidement les bactéries. Vous pouvez le prouver en titrant pour CFU avant et après agitation avec CHCl3. Obtenir de nouveaux phages à partir de bactéries induites prend un certain temps (la période de latence de l'induction) et peu probable à partir de bactéries rapidement tuées.
Quel est le rôle du chloroforme dans l'isolement du bactériophage ?
Avec les coli-phages, le traitement au chloroforme est généralement utilisé pour tuer toutes les bactéries présentes et l'étape de stérilisation par filtre est parfois omise. Le chloroforme peut inactiver certains phages et doit être utilisé avec prudence et contrôles appropriés. L'azide de sodium peut également être utilisé pour certains phages.
À quoi sert le chloroforme pour préparer le lysat pendant l'isolement du phage ?
Le chloroforme est ajouté pendant 15-20 min pour lyser les cellules libérant ainsi les particules virales dans le milieu.
Comment isoler les bactériophages ?
L'isolement des bactériophages pour la phagothérapie est souvent présenté comme un exercice assez simple consistant à mélanger un échantillon contenant des phages avec des bactéries hôtes, suivi d'une simple élimination des débris bactérienspar filtration et/ou centrifugation le lendemain [1, 2, 3].
