Incuber le récipient à température ambiante pendant 2-3 minutes . Les cellules fermement adhérentes peuvent être détachées rapidement à 37 °C. Observez les cellules au microscope. Les cellules détachées apparaissent arrondies et réfringentes au microscope.
Que se passe-t-il si vous trypsinisez les cellules trop longtemps ?
Incuber des cellules avec une concentration de trypsine trop élevée pendant une trop longue période endommagera les membranes cellulaires et tuera les cellules. En cas de doute sur la concentration de trypsine à utiliser, utilisez une faible concentration.
Comment trypsiniser les cellules ?
Les cellules peuvent être remises en suspension en pipetage délicat de la suspension cellulaire pour briser les amas. Une dilution supplémentaire peut être effectuée, si nécessaire, pour le comptage des cellules et/ou la sous-culture.
Combien de temps faut-il pour que les cellules se fixent ?
les premières cellules s'attachent déjà après 3-5 min ! D'après mon expérience, la plupart des EC étaient attachés après 10 à 20 minutes. Mais plus vous attendez, plus l'attachement est ferme.
Est-ce mauvais de trypsiniser les cellules deux jours de suite ?
Oui, il est nocif de trypsiner vos cellules en continu après 24 heures de division. Il est conseillé de procéder à la division après 48 heures de division. … Vous pouvez maintenir les cellules jusqu'à ce que la morphologie soit bonne (Cela dépend de votre type de cellule, certaines cellules peuvent aller jusqu'à 80 passages et d'autres jusqu'à 10).
