Utilisez des fluorophores qui émettent dans une longueur d'onde plus éloignée des composés autofluorescents de votre échantillon. En règle générale, les fluorophores de longueur d'onde rouge lointain tels que CoralLite 647 sont les meilleurs pour cela. Il a été démontré que les réactifs disponibles dans le commerce, tels que TrueVIEW (VectorLabs), réduisent l'autofluorescence de plusieurs causes.
Qu'est-ce qui cause l'autofluorescence ?
L'autofluorescence est l'émission de lumière fluorescente par les structures oculaires en l'absence de fluorescéine sodique. Les conditions qui causent l'autofluorescence sont les drusen de la tête du nerf optique et l'hamartome astrocytaire. La pseudofluorescence se produit lorsque l'excitateur bleu et les filtres barrière verts se chevauchent.
Comment réduire la fluorescence de fond ?
Ce que vous pouvez faire pour diminuer la fluorescence de fond
- Essayez d'étiqueter avec un colorant qui correspond à un filtre différent. …
- Mesurez l'intensité de la fluorescence d'un puits contenant uniquement vos cellules et le médicament ou le traitement. …
- Vérifiez vos médias. …
- Vérifiez votre bateau.
Comment éteindre l'autofluorescence du sang ?
L'une des méthodes les plus largement utilisées pour éteindre l'autofluorescence est le traitement des tissus avec le colorant Sudan Black B. Le noir de Soudan B est un colorant soluble dans les lipides qui se lie aux granules de lipofuscine pour réduire leur fluorescence.
Qu'est-ce que l'autofluorescence en microscopie ?
L'autofluorescence est l'émission naturelle de lumière par desstructures telles que les mitochondries et les lysosomes lorsqu'ils ont absorbé la lumière, et est utilisé pour distinguer la lumière provenant de marqueurs fluorescents ajoutés artificiellement (fluorophores).
