Les anticorps de contrôle de chargement sont des contrôles importants car ils indiquent le chargement égal des échantillons dans tous les puits. Les contrôles de chargement indiquent également le transfert correct des protéines vers la membrane pendant le processus de transfert Western. Les contrôles de chargement sont généralement des protéines à expression élevée et omniprésente.
À quoi sert un contrôle de chargement ?
Un contrôle de charge est une protéine utilisée comme contrôle dans une expérience de transfert Western. … Ils sont utilisés pour s'assurer que la protéine a été chargée de manière égale dans tous les puits.
Pourquoi utilisons-nous un contrôle de chargement dans Western blot ?
Les contrôles de chargement ont un deuxième rôle en tant que contrôle dans les western blots. Ils peuvent être utilisés pour vérifier qu'il y a eu un transfert uniforme du gel à la membrane sur l'ensemble du gel. Ceci est impératif lorsque des comparaisons sont faites des niveaux d'expression des protéines entre les échantillons.
Comment utilisez-vous le contrôle de chargement dans Western blot ?
Les signaux des contrôles de chargement sont généralement utilisés pour normaliser les signaux des protéines d'intérêt. Pour utiliser un contrôle de chargement à ces fins, la détection avec l'anticorps de la protéine de contrôle et l'anticorps expérimental doit être effectuée sur le même blot. Une variété de protéines différentes sont utilisées comme contrôles de charge.
Pourquoi l'actine est-elle utilisée comme contrôle de charge ?
Bêta-actine, est généralement utilisé comme contrôle de charge pour Western Blot pournormaliser les niveaux de protéines détectés en confirmant que la charge en protéines est la même sur tout le gel.
