Pouvez-vous stocker un plasmide digéré ?

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Pouvez-vous stocker un plasmide digéré ?
Pouvez-vous stocker un plasmide digéré ?
Anonim

Le produit de la digestion de restriction peut être facilement stocké à -20 C. À 4 C ce serait bien mais pour s'assurer qu'il n'y a pas d'activité et pas d'activité en étoile c'est recommandé de le conserver à -20 °C.

Comment stocker l'ADN digéré ?

Essayez de conserver la tranche de gel au réfrigérateur pendant la nuit, ou même de faire fondre la tranche dans un tampon et de la congeler à -20°C ou -80°C. La dégradation de l'ADN se produira au même rythme et dans les mêmes conditions que l'ADN soluble, utilisez donc une température plus froide pour un stockage plus long.

Qu'est-ce que cela signifie pour un plasmide d'être digéré ?

L'ADN plasmidique purifié est digéré avec 1 ou plusieurs enzymes de restriction (ER) sélectionnées pour donner un motif de bande d'ADN distinct qui est facilement résolu par électrophorèse. … Les enzymes de restriction qui coupent dans le site de clonage multiple (MCS) et entraînent un schéma de diagnostic de 2 à 5 bandes faciles à résoudre sont généralement sélectionnées.

Comment stocker les plasmides linéarisés ?

Si vous vous inquiétez des effets en aval du TE, stockez l'ADN à une concentration plus élevée et diluez-le si nécessaire, ou utilisez "bas TE" qui est de 10 mM de Tris / EDTA 0,1 mM. lorsque l'ADN ou l'ARN est propre, il peut être stocké à -20 ° C pendant plusieurs mois sans aucune dégradation.

Combien de temps pouvez-vous conserver le résumé des restrictions ?

Pro-Tip Selon l'application et la quantité d'ADN dans la réaction, le temps d'incubation peut aller de 45 minutes à une nuit. Pour les résumés de diagnostic, 1-2 heures est souvent suffisant. Pour les digestions avec >1 µg d'ADN utilisé pour le clonage, il est recommandé de digérer pendant au moins 4 heures.

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